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 請問如果封片膠沒有完全覆蓋蓋玻片與載玻片接縫處,會影響FISH實驗結果嗎?
避免雜合的過程中探針蒸發過多,而影響結果甚至是造成背景骯髒,請務必在蓋玻片與載玻片接縫處,確實用封片膠覆蓋。
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 將螢光探針滴在玻片樣本上,之後我要如何蓋上蓋玻片才不會產生氣泡?
建議蓋玻片覆蓋時,以45度角小面積開始緩慢而輕輕覆蓋。
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 請問FISH雜合(hybridization) 時,實驗中的玻片要如何放置在37°烘箱(oven)或培養箱(incubator)?
建議放置保鮮盒中,並且在底部鋪滿溼潤的紙巾來保持一定的溼度,之後就將玻片放在保鮮盒中置於37°培養箱。
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 請問FISH雜合(hybridization) 的溫度以及作用的時間?
建議37°C 溫度下,最佳作用時間12~16小時之間,太短的作用時間會降低訊號表現,時間過長會產生大量背景。
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 請問變性溶液(denature solution)如何保存?
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 請問不足或是過度加熱變性(denature)玻片樣本會影響FISH實驗結果嗎?
在玻片樣本加熱變性的步驟當中,過高的溫度以及過久的時間都會導致細胞染色體結構上傷害 ,嚴重者不僅不能清楚辨認出染色體正確編號,甚至與螢光探針結合度下降 ; 相對地如果溫度與作用時間不足,也是會使得FISH實驗結果不如預期。
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 請問進行FISH實驗前,玻片樣本加熱變性的步驟需要特別留意什麼?
如果是進行玻片與探針分別加熱變形,請先將變性溶液(denature solution)要置於水域槽72°C (請依照各實驗室標準步驟)預熱30分鐘以上 ,才能開始進行實驗 ; 如果是選擇玻片與探針共同加熱變性法 (co-denature) ,請先將加熱金屬板72°C 預熱30分鐘以上, 注意蓋玻片與載玻片之間的封片膠是否確實完整覆蓋到,之後非石蠟切片檢體為72°C加熱2分鐘,石蠟切片檢體為72°C加熱5分鐘。
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 請問FISH結果出來,背景太髒的情況下,我可以進行2次清洗嗎?
可以, 但是會有少許螢光探針脫落的可能性, 請參考本公司網站上清洗玻片步驟,清洗步驟結束後,仍然需要重新滴上DAPI方能在顯微鏡下觀察。
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 請問清洗液加熱之後變成白色混濁狀,請問這是正常現象嗎?
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 請問如何保存清洗溶液 (Washing Buffer)?
請室溫保存即可,或是存放在4°C冰箱保存,並且請在使用過的當天丟棄使用過的清洗溶液。
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