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 因为石蜡包埋玻片十分珍贵,请问我可以相同位置的石蜡包埋样本,先后处理不同的荧光探针检测组吗?
不建议,通常结合上染色体细胞的荧光探针,即使用变性溶液(denature solution) 在高温下可以去除大部份荧光探针,仍然会有少部份无法完全去除而变成干扰的背景 ; 但是如果使用相同的荧光探针检测组,是可以在相同位置的石蜡包埋样本进行FISH实验。
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 请问脱水用的酒精需要多久就更换一次?
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 请问如何利用已经经过染色体G带染色 (G-banding) 后的染色体玻片,再进行FISH实验?
首先利用二甲苯溶液清洗染色体玻片2分钟以去除表面油质,之后使用甲醇浸泡玻片2分钟,然后使用固定液(甲醇 : 冰醋酸 = 3 : 1)处理玻片进行褪染20分钟,之后用纯水5 分钟清洗两次,目的为洗去固定液,最后使用磷酸盐类缓冲溶液5 分钟清洗两次,再进行酒精脱水步骤,分别为 70%,90% ,100%个别处理1分钟,然后自然蒸发干即可。
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 请问细胞染色体玻片过度老化会影响FISH实验结果吗?
过度老化会造成染色体结构过度硬化并且降低FISH实验效果。
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 请问如何长期保存细胞染色体玻片?
请放置在低温-20°C 冰箱可以保存6个月,浸泡在低温-20°C 的100%绝对酒精里可以保存数年, 建议实验前37°C回温半小时以上并且使水气蒸发
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 请问如何使细胞染色体玻片经过老化步骤的使得染色体样本结构紧实,有利于FISH实验结果?
细胞染色体玻片刚制成好时,必须37°C 老化 1~3 天,以帮助染色体结构更加紧实固定,或者是65°C 处理玻片隔夜 ,因为时间上限制的关系也可以选择90°C 快速加热30分钟 ,之后可室温保存数星期提供短期间使用, 详细步骤请参考本公司网站的操作提示。
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 请问如何保存停滞在细胞中期的细胞?
使用新鲜固定液清洗并且固定细胞后,保存在低温-20°C冰箱, 建议分装使用并且减少反复冻融的次数。
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 请问如何制备最佳的细胞染色体玻片?
建议使用新鲜固定液 (甲醇 : 冰醋酸 = 3 : 1) 清洗并且增加清洗次数,帮助去除细胞杂质,详细步骤请参考本公司网站的操作提示。
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 我所制备的细胞染色体玻片都有一圈光晕包附在染色体或细胞外,请问形成这样型态的细胞玻片的原因是什么?
固定后的细胞悬浮液滴在玻片上后,干燥时间过于快速会导致染色体或是细胞外面有发亮光圈,建议提高滴片环境的湿度,譬如将空白玻片放置在温度高于65°C水浴槽上方,在有水蒸气状况下至少20分钟才能进行滴片
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 请问什么形态的细胞染色体玻片最适合进行FISH实验?
最佳状态的染色体玻片, 是指一般光学显微镜下观察到玻片上的染色体平均扩散开来,不重叠交缠一起,颜色呈现深灰色接近黑色状 ; 大量且集中的细胞染色体玻片可以节省荧光探针使用的范围,也进而节省荧光显微镜观察的时间
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